下调丙酮酸激酶2表达对膀胱癌T24细胞株生物学特性的影响

摘要

目的:观察丙酮酸激酶2(pyruvate kinase M2,PKM2)基因表达对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭迁移的影响,探讨其可能的机制。方法:免疫组织化学法检测50例膀胱癌及15例正常膀胱组织的PKM2蛋白表达;利用脂质体2000将PKM2-siRNA和对照siRNA分别转染膀胱癌T24细胞株,筛选并鉴定PKM2-RNAi和对照载体(RNAi-Vector)稳定表达的肿瘤细胞株,将未转染和转染无义siRNA的细胞分别作为空白组和阴性对照组,PKM2 siRNA为实验组。采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中PKM2的mRNA和蛋白的表达量,MTT法检测细胞的增殖变化,Transwell法、划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力。结果:PKM2蛋白在膀胱癌组织中的阳性表达率明显高于正常膀胱组织,且与病理分级和临床分期相关;与空白对照、阴性对照比较,实验组细胞中PKM2 mRNA及蛋白表达减少(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),穿膜细胞数减少(P<0.05),迁移能力下降(P<0.05)。结论:PKM2的过表达可能在膀胱癌的发生发展过程中发挥重要作用,下调PKM2基因表达能抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭、迁移。