shRNA干扰介导PLCε基因表达下调对膀胱癌T24细胞生长的影响

摘要

目的:探讨shRNA干扰沉默PLCε基因对人膀胱癌T24细胞生长的影响。方法:体外构建PLCε基因的shRNA的重组质粒,Lipofectamine2000介导法转染T24细胞,采用RT-PCR方法检测特异性shRNA的重组质粒对PLCε基因沉默效果,转染后采用MTT法检测shRNA的重组质粒对细胞增殖的作用,免疫细胞化学染色法检测T24细胞PCNA的表达,电镜观察细胞超微结构的改变。结果:shRNA的重组质粒能有效下调PLCε基因的表达,抑制率为78.01%,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01);细胞增殖活性受到明显抑制,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01);细胞内PCNA含量明显低于空白对照组和阴性质粒组,其差异有统计学意义(P<0.01);细胞形态改变产生凋亡小体。结论:PLCε基因有望成为应用RNAi技术探索治疗膀胱癌潜在的靶基因。