人脐带间充质干细胞促进宫腔粘连大鼠子宫内膜增殖与分化

摘要

目的:评估人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUCMSC)对宫腔粘连大鼠损伤子宫内膜增殖分化的影响.方法:首先以自身对照为原则构建宫腔粘连大鼠模型20只,造模14 d后将其随机分为干细胞组(n=10)和对照组(n=10);获取人脐带标本后分离培养hUCMSC,传至第三代时将0.5 mL hUCMSC悬液多点注射于干细胞组造模侧子宫;另在对照组造模侧子宫注射等量的磷酸盐缓冲液,2组未造模侧子宫均不处理.干预7d后获取子宫组织,使用免疫荧光染色检测人核抗体、子宫内膜上皮细胞标记物角蛋白(CK)抗体和间质细胞标记物波形蛋白抗体在大鼠子宫中的分布情况,以此评估hUCMSC在大鼠子宫中的定植和分化;使用免疫组化染色和实时荧光定量聚合酶链反应观察大鼠子宫组织增殖细胞核抗原Ki-67和CK的表达量及其mRNA表达水平.结果:宫腔粘连大鼠模型子宫内膜组织表现为子宫腔缩窄,内膜腺体稀疏,腔上皮缺失,间质内无细胞结构区域增多;另子宫宫腔剖视可见其形态欠规则,颜色苍白,粘连带形成,宫腔欠通畅,部分闭塞.体外培养的hUCMSC在细胞形态及免疫表型方面均符合hUCMSC特征.干细胞组中,在人核与波形蛋白共同染色切片中,红色荧光与绿色荧光共同显影于同一细胞;且干细胞组的Ki-67和CK的平均光密度和mRNA表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:hUCMSC可在损伤部位存活并定植,并可能通过上调Ki-67和CK表达改善组织修复微环境而非经分化为子宫内膜细胞起作用.