天麻抗真菌蛋白基因的克隆及其启动子活性(英文)

摘要

通过构建和筛选天麻 (GastrodiaelataBl.)基因组文库 ,克隆了一个天麻抗真菌蛋白基因组DNA。该基因组DNA含有一个 5 16碱基组成的编码区 ,没有内含子结构。其启动子区含有保守的TATA盒及CAAT盒。为研究启动子活性 ,构建了 - 115 7bp启动子区与GUS基因的融合表达载体。并将其用农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导的遗传转化方法导入烟草 (Nicotianatabacum)中 ,获得了稳定转化的烟草。利用荧光检测及组织化学染色法对GUS表达进行了分析。结果表明 ,该启动子能够启动GUS基因在转基因烟草中组织特异性地表达。GUS基因在根中的表达水平最高 ,茎中次之 ,叶中只有低水平表达。而且该启动子具有诱导表达活性 ,可被真菌及水杨酸、茉莉酸强烈诱导表达。