大鼠尿液与粪便中氟噻草胺的UPLC-MS/MS法测定

摘要

建立了一种测定大鼠尿液和粪便中氟噻草胺含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法.粪便与尿液样品采用乙腈提取;液相色谱分离采用Phenomenex反向C18色谱柱(50 mm ×4.6 mm,5μm),以0.1％甲酸水和乙腈为流动相,流速0.6 mL/min;质谱检测采用电喷雾离子源,正离子模式和多反应监测(MRM)方式进行扫描.结果表明:氟噻草胺在尿液(0.10～10.0 mg/L)和粪便(0.25～50.0 mg/L)中线性关系良好,相关系数r＞0.99,尿液和粪便中氟噻草胺的定量下限分别为0.10 mg/L和0.25 mg/L;质控样品的日内与日间相对标准偏差不大于9.9％.样品稳定性为93.7％～ 108％,尿中平均提取回收率为97.0％ ～ 98.8％,基质效应为98.8％～107％,均符合生物分析方法验证的要求.考察了大鼠单次灌胃给予氟噻草胺400 mg/kg后的排泄动力学,144 h内尿液与粪便的总累积排泄率为12.62％,其中尿中的累积排泄率为1.12％,粪便中的累积排泄率为10.13％,表明氟噻草胺主要经粪便排泄.该法灵敏、专属、准确,可用于大鼠尿液、粪便中氟噻草胺浓度的测定.