PMP柱前衍生高效液相色谱法分析杜氏盐藻多糖的单糖组成

摘要

建立了柱前PMP衍生高效液相色谱法分离检测8种中性糖、2种糖醛酸及2种糖胺的方法.筛选出适合PMP衍生物分离的色谱柱为Eclipse XDB-C18,以0.1 mol/L磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,考察了pH值和乙腈体积分数对各种糖的PMP衍生物的保留及分离的影响,确定最佳pH值为6.7,最佳乙腈体积分数为17%;比较了不同衍生反应时间和萃取除杂前不同量盐酸中和反应产物时醛糖-PMP衍生物的峰面积大小变化,从而得到较佳的样品衍生化条件.应用优化的色谱条件和样品制备方法,测定了由杜氏盐藻提取纯化的多糖级分PD4a和PD4b的单糖组成,其测定结果与高效阴离子交换色谱法的结果基本一致.