TGF-β1对小鼠表皮细胞生长动力学影响的研究

摘要

目的 探讨离体培养条件下FTGF-β1时小鼠表皮细胞生长动力学的影响.方法 分离培养c-57小鼠表皮细胞,以每孔5×104细胞接种于96孔板,培养72 h后,(1)加入不同浓度的TGF-β1,观察其对表皮细胞生长的抑制作用;(2)加入不同浓度抑制剂SB431542,30 min后加入10μg/mL TGF-β1,观察其对TGF-β1的拮抗作用.以XTT法测定细胞增殖曲线.以BrdU标记,JBDAKO-BrdUrd单克隆抗体共孵育,用荧光标记兔抗鼠二抗显色,用PI衬染,流式细胞仪分析,计算不同细胞周期比率和细胞周期时间.结果 TGF-β1可抑制小鼠表皮细胞的增殖,并有浓度依赖性,且作用时间越长,抑制作用越显著.SB431542能拮抗TGF-β1对表皮细胞的抑制作用,且当10-5 mol/L时拮抗作用最强.流式细胞仪分析显示,用10μg/mL TGF-β1作用52 h后,G0/G1期细胞百分率显著增加(从47%增加到78%),BrdU阳性百分率下降95%,BrdU阳性细胞的下降6S期细胞下降平行.结论 培养条件下TGF-β1可以使小鼠表皮细胞生长停止于G0/G0,期,具有抑制细胞增殖的作用.SB43154可以拮抗TGF-β0对小鼠表皮细胞生长的抑制作用.