竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒五种磷脂酶A2的分离纯化和氨基酸序列分析

摘要

用超细Sephadex G-75凝胶色谱和C4反相高效液相色谱从竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒中分离纯化5种磷脂酶A2,并分别命名为PLA2-Ⅰ(SWISS-PROT, P82892)、Ⅱ(SWISS-PROT, P82893)、Ⅲ(SWISS-PROT, P82894)、Ⅳ (SWISS-PROT, P82895)、Ⅴ(SWISS-PROT, P82896).SDS-PAGE测定它们的分子量分别为14.0、15.8、15.0、14.0和14.0?kDa.等电聚焦电泳测得PLA2-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ呈碱性, 等电点大于8.8;PLA2-Ⅳ和Ⅴ呈酸性,等电点分别为5.2和4.7. PLA2-Ⅳ和Ⅴ有水解卵磷脂活性.用自动Edman降解法测定了PLA2-Ⅴ的全部氨基酸序列和PLA2-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的N-端部分氨基酸序列.PLA2-Ⅴ由122个氨基酸残基组成,有14个Cys,并与其它来源的PLA2的氨基酸序列进行了比较.