猪链球菌ZKHY株gdh基因的克隆与序列分析

摘要

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,以ZKHY株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,转化宿主菌JM109中进行序列测定.将测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析.序列分析显示,成功克隆了猪链球菌ZKHY株的gdh基因, ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有密切的亲缘关系,核酸序列与血清2、7、9型的同源性为97.2%～98.4%,其中与2型菌株同源性为97.2%～97.3%;与7型菌株同源性为98.4%;与9型菌株同源性为97.6%.其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上. ZKYH株可能是属于2、7、9型之外的其他血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达以用作免疫学方面的相关研究.