猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

摘要

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析，为进一步研究其功能打下基础。以zKHY的基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段，克隆于pMD-18T载体，构建成载体pMD-18T-gdh，转化宿主菌DH5a中进行筛选鉴定和序列测定。测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析。成功地克隆了猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因，序列分析显示ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有紧密的亲缘关系，核酸序列与2、7、9几个主要致病血清型的同源性在97.2％～98.4％，其中与2型菌株同源性在97.2％-97.3％;与7型菌株在98.4％;与9型在97.6％。其编码的氨基酸序列同源性则更高，与GenBank中已收录的序列同源性在98.9％以上。该分离株可能是属于2，7，9型之外的其它致病的血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守，可以进行表达，进行免疫学方面的相关研究。