猪繁殖与呼吸综合征病毒不同毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

摘要

根据GenBank登录的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、经典型猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)、与NADC 30-like猪繁殖与呼吸综合征病毒(NADC 30-like PRRSV)Nsp2基因的核苷酸序列,设计了1对用于扩增3种不同毒株的RT-PCR引物,建立了HP-PRRSV、C-PRRSV、NADC 30-like PRRSV等3种毒株RT-PCR鉴别诊断的方法,该方法可扩增出1072 bp (C-PRRSV),985 bp(HP-PRRSV)与682 bp(NADC 30-likePRRSV)的特异性片段,而对猪瘟病毒,伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型检测均为阴性.敏感性试验结果表明,对HP-PRRSV,C-PRRSV、NADC 30-like PRRSV的最低核酸检出量分别为385,269,402 pg,对来自临床的39份组织样品进行检测,检测阳性率为51％.该方法可用于3种不同PRRSV毒株临床快速检测与流行病学调查.