不同年龄大鼠骨髓间充质干细胞来源的外泌体对血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究

摘要

目的:探讨不同年龄大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(BMSCs-Exos)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及机制.方法:提取年轻大鼠和老年大鼠的BMSCs并进行鉴定,收集细胞培养上清中的外泌体并鉴定.将VSMCs分为4组:空白对照组、β-甘油磷酸钠(β-GP)组、β-GP+年轻大鼠BMSCs-Exos(Young-Exos)组和β-GP+老年大鼠BMSCs-Exos(Aged-Exos)组.除空白对照组外,其他3组用含10 mmol/L β-GP的完全培养基培养14 d,诱导VSMCs钙化;茜素红S染色法检测各组钙化情况;Western blotting法检测特异蛋白1(Spl)、成骨转化标志蛋白Runt相关转录因子2重组蛋白(RUNX2)和a平滑肌肌动蛋白(aSMA)的蛋白表达.结果:与空白对照组比较,β-GP组出现颜色较深的橘红色钙盐结节,β-GP+Young-Exos组较β-GP组和β-GP+Aged-Exos组钙盐结节数量明显减少,且橘红色着色浅.与空白对照组比较,β-GP组Sp1和RUNX2蛋白表达量升高,aSMA蛋白表达量降低(均P＜0.05);与β-GP组比较,β-GP+Young-Exos组Spl和RUNX2蛋白表达量降低,aSMA蛋白表达量升高(均P＜0.05),而β-GP+Aged-Exos组与β-GP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:不同年龄大鼠BMSCs-Exos对动脉钙化的影响不同,其中Young-Exos干预能减轻VSMCs钙化,其机制可能与下调Spl和RUNX2表达、上调aSMA表达有关.