MyosinⅥ和Disabled-2表达水平对小鼠内毛细胞胞吞和胞饮作用的影响

摘要

目的:研究肌球蛋白Ⅵ(MyosinⅥ)和Disabled-2(Dab2)对小鼠内毛细胞(IHC)胞吞和胞饮的影响.方法:分离BALB/C小鼠基底膜,进行IHC原代培养,构建MyosinⅥ、Dab2基因重组过表达及RNAi载体并转染至IHC内.采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测各组细胞MyosinⅥ、Dab2 mRNA的表达水平,Western blotting法检测MyosinⅥ、Dab2蛋白的表达水平,划痕实验检测各组IHC迁移能力,并检测各组IHC胞饮和胞吞情况.结果:过表达联合组MyosinⅥ、Dab2 mRNA及其蛋白表达水平,转染12 h、24 h、48 h、72 h后迁移距离、胞吞荧光颗粒数量均最高,而RNAi联合组上述指标均为最低(均P<0.05);胞饮实验显示,RNAi联合组IHC胞饮作用最弱,过表达联合组IHC胞饮作用最强(P<0.05).结论:MyosinⅥ、Dab2均具有促进IHC胞吞和胞饮的作用,并具有协同作用.