2型糖尿病对雄性小鼠听觉功能及内耳Otoferlin、VGLUT3、Myosin Ⅶa蛋白表达的影响

摘要

目的 观察2型糖尿病对雄性小鼠听觉功能,静纤毛超微结构和耳畸蛋白(Otoferlin)、囊泡谷氨酸转运体3(vesicle glumate transporter 3,VGLUT3)、肌球蛋白Ⅶa(MyosinⅦa)蛋白表达的影响.方法 按体重将12只6周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为两组(对照组和糖尿病组,n=6).对照组小鼠食用饲料含铁量为(8.26±2.67) mg/kg,糖尿病组小鼠食用饲料含铁量为(8.39±1.03) g/kg.在实验开始前及实验第4、8、12、16周时测定小鼠血糖,实验第16周时测定葡萄糖耐量及胰岛素耐量,测定听觉诱发电位.分离左侧耳蜗基底膜,用免疫荧光法观察Otoferlin、VGLUT3与MyosinⅦa在内外毛细胞的定位与分布.分离右侧半数耳蜗用作western blot分析蛋白表达,另外半数耳蜗分离基底膜,用扫描电镜观察内毛细胞静纤毛形态.结果 实验第8、12、16周,糖尿病组小鼠血糖水平升高,与对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05).糖尿病组小鼠糖耐量减弱,胰岛素抵抗指数升高,与对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05).糖尿病组小鼠听力诱发电位阈值在刺激频率为2和3 kHz时升高,与对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05).糖尿病组小鼠内毛细胞静纤毛排列正常,未见紊乱及数目减少;糖尿病组Otoferlin在内毛细胞底部表达减少,与对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论 2型糖尿病致雄性小鼠听觉功能损伤,可能与Otoferlin蛋白在耳蜗毛细胞中表达下调有关.