1,25二羟维生素D3对卵巢癌A2780细胞自噬和凋亡的影响

摘要

目的:探讨1,25二羟维生素D3(VD3)对卵巢癌A2780细胞自噬和凋亡的影响.方法:将细胞随机分为对照组、低、中、高剂量组、高剂量+IGF-1组.低、中、高剂量组卵巢癌A2780细胞分别用2.5 nmol/L、5nmol/L、10 nmol/L VD3处理24h,高剂量+IGF-1组用10 nmol/L VD3和10 ng/mL IGF-1处理24 h.BrdU染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光检测LC3的含量;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白(Caspase3、Caspase9)、自噬相关蛋白(ATG7、Beclin1、LC3)和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白的表达水平.结果:与对照组比较,中、高剂量组BrdU阳性细胞数显著减少(P＜0.05);细胞凋亡率、活化的Caspase3/Caspase3和活化的Caspase9/Caspase9蛋白表达的比值、LC3水平、ATG7和Beclin1蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);低、中、高剂量组LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ蛋白表达水平比值显著升高(P＜0.05);PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平显著降低(P＜0.05).激活PI3K/AKT/mTOR通路逆转VD3对A2780细胞的作用(P＜0.05).结论:VD3可抑制PI3K/AKT/mTOR通路的磷酸化,诱导卵巢癌A2780细胞自噬和凋亡.