PI3K/Akt/mTOR

摘要： 目的:探讨miR-15b-5p是否调控磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/mTOR信号通路影响肾癌细胞(A-498)凋亡和氧化应激反应。方法:运用实时定量PCR分析肾癌组织中miR-15b-5p表达水平。流式细胞术分析抑制或过表达miR-15b-5p对A-498细胞凋亡的影响。试剂盒分析丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平。免疫印迹法分析磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)相关蛋白表达水平。结果:肾癌组织中miR-15b-5p表达水平显著升高(P<0.05)。抑制miR-15b-5p表达显著促进A-498细胞凋亡,增加MDA含量,降低SOD和CAT水平,并下调p-p85、p-Akt和p-p70S6K1蛋白表达水平(P<0.05),而过表达miR-15b-5p具有相反作用(P<0.05)。PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂GNE-477显著促进A-498细胞凋亡,增加MDA含量,降低SOD和CAT水平(P<0.05)。GNE-477还可减弱miR-15b-5p过表达对A-498细胞凋亡和氧化应激反应的影响(P<0.05)。结论:肾癌中miR-15b-5p表达显著增加。抑制miR-15b-5p表达通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路可促进肾癌细胞凋亡和氧化应激损伤。

摘要： 目的探讨麻黄附子细辛汤对阳虚型非小细胞肺癌小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法C57BL/6小鼠按随机分配分为模型组,化疗组,麻黄附子细辛汤高、中、低剂量组(中药高、中、低组),联合组(麻黄附子细辛汤高剂量组+顺铂),建立阳虚型非小细胞肺癌小鼠模型。造模成功后进行分组给药,采用Western Blot法检测小鼠肿瘤组织PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达水平。结果①麻黄附子细辛汤、化疗药可减弱PI3K p85a、PI3K p110a蛋白表达水平,暂可认为两药存在交互协同作用;②麻黄附子细辛汤与化疗药物合用对降低Akt、p-Akt蛋白表达具有较明显的协同作用;③麻黄附子细辛汤和顺铂联用对减弱mTOR、p-mTOR蛋白的表达具有协同作用。结论本实验从整体药效方面探讨麻黄附子细辛汤阻断阳虚型非小细胞肺癌小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的机制,研究发现麻黄附子细辛汤可一定程度上减弱PI3K、Akt、mTOR蛋白的表达水平,对PI3K/Akt/mTOR信号通路的传导具备一定的抑制功效。

摘要： 目的:探究双硫仑(DSF)对人卵巢癌细胞恶性程度及其对化疗药物敏感性的影响及相关机制。方法:使用不同浓度DSF(0.1μmol·L^(-1)、1μmol·L^(-1)、5μmol·L^(-1))处理卵巢癌细胞SK–OV–3和A278,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)测定细胞活性。选取DSF有效浓度(5μmol·L^(-1))处理细胞,通过软琼脂糖克隆形成实验、微球形成实验检测干细胞特性,Transwell实验检测细胞迁移,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测Wnt靶基因的信使核糖核酸(mRNA)表达,双荧光素酶法检测Wnt通路的转录活性,免疫印迹实验检测PI3K/AKT/mTOR和RAF/MEK/ERK的激活情况。采用DSF(5μmol·L^(-1))和顺铂联合处理SK–OV–3和A2780细胞,并使用MTT实验、软琼脂糖克隆形成实验和微球形成实验检测DSF对顺铂药物敏感性的影响。结果:与对照组相比,DSF处理能够显著降低卵巢癌细胞的增殖能力(P<0.01),降低软琼脂糖中癌细胞克隆形成能力(P<0.01),抑制卵巢癌细胞在悬浮培养下的微球形成(P<0.01)以及细胞的迁移能力(P<0.01),从而降低卵巢癌细胞的恶性程度。在与顺铂药物联合使用情况下,DSF联合用药显著增强卵巢癌细胞对顺铂药物的敏感性(P<0.01)。机制方面的研究表明DSF处理显著降低卵巢癌细胞中Wnt信号通路活性,同时显著抑制卵巢癌细胞中RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR通路的激活。结论:DSF处理可显著降低卵巢癌细胞的恶性程度,同时增强其对传统化疗药物顺铂的敏感性。DSF抑癌作用可能是通过抑制Wnt、RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR等癌症促进信号通路的活性来实现的。

摘要： 溶血磷脂酸酰基转移酶(Sn-1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase 6,AGPAT6)是脂类物质合成代谢相关酶,但其在奶牛乳脂合成中调节作用尚不明确。研究采用荧光定量PCR、Western blot等方法检测奶牛泌乳循环过程中乳腺组织中AGPAT6表达变化、奶牛乳腺上皮细胞中AGPAT6对乳脂合成影响以及相关信号通路分子表达变化。结果表明,AGPAT6 mRNA和蛋白质表达在泌乳期奶牛乳腺组织中极显著高于青春期和干奶期(P<0.01)。在具有乳脂合成能力的奶牛乳腺上皮细胞中,AGPAT6基因过表达极显著提高细胞中TAG含量,AGPAT6基因干扰获得相反结果。AGPAT6过表达可激活PI3K-AKT-mTOR信号通路,添加PI3K抑制剂会抑制AGPAT6诱导PI3K-AKT-mTOR信号通路激活及细胞中TAG合成(P<0.01)。以上结果显示AGPAT6表达与泌乳奶牛乳脂合成呈正相关,AGPAT6通过激活PI3K-AKT-mTOR信号通路促进奶牛乳腺上皮细胞中乳脂合成。

摘要： 目的 探讨脯氨酸4-羟化酶Ⅱ(P4HA2)在肝癌细胞发生发展中的作用及相关机制。方法 利用GEPIA、Human Protein Atlas数据库预测P4HA2在肝癌中的表达情况,利用K-M plotter在线数据库分析P4HA2的表达情况与肝癌预后的关系,采用qRT-PCR和Western blot检测肝癌细胞和正常肝细胞中P4HA2的表达。构建慢病毒载体,用携带P4HA2 shRNA和Con shRNA的慢病毒载体分别转染肝癌SNU-449和Hep-3B细胞系,建立沉默表达P4HA2的细胞株(shP4HA2组)和对照组细胞株(NC组)。采用CCK-8、集落形成试验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用Western blot实验检测上皮-间质转化和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果 在线数据库分析结果显示,肝癌组织中P4HA2表达高于正常肝组织(P<0.05)。同时,肝癌细胞系中P4HA2 mRNA和蛋白表达水平也高于正常肝细胞(P<0.01)。慢病毒干扰后,与NC组相比,shP4HA2组中mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05)。P4HA2基因表达沉默后,细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。Western blot显示,相对于NC组,shP4HA2组的E-cadherin蛋白表达上升,N-cadherin、Snail蛋白表达下降(P<0.05),在PI3K/AKT/mTOR通路中,磷酸化的PI3K(P-PI3K)、AKT(P-AKT)和m TOR(P-mTOR)显示出较低的水平(P<0.05)。结论 P4HA2通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进肝癌的发生发展。

摘要： Objective Intracerebral hemorrhage(ICH)refers to predominant,sporadic,and non-traumatic bleeding in the brain parenchyma.The PI3K/AKT/mTOR signaling pathway is an important signal transduction pathway regulated by enzyme-linked receptors and has many biological functions in mammals.It plays a key role in neuronal metabolism,gene expression regulation,and tissue homeostasis in the healthy and diseased brain.Methods In the present study,the role of the PI3K/AKT/mTOR pathway inhibitor chrysophanol(CPH)(10 mg/kg and 20 mg/kg,orally)in the improvement of ICH-associated neurological defects in rats was investigated.Autologous blood(20µL/5 min/unilateral/intracerebroventricular)mimics ICH-like defects involving cellular and molecular dysfunction and neurotransmitter imbalance.The current study also included various behavioral assessments to examine cognition,memory,and motor and neuromuscular coordination.The protein expression levels of PI3K,AKT,and mTOR as well as myelin basic protein and apoptotic markers,such as Bax,Bcl-2,and caspase-3,were examined using ELISA kits.Furthermore,the levels of various neuroinflammatory cytokines and oxidative stress markers were assessed.Additionally,the neurological severity score,brain water content,gross brain pathology,and hematoma size were used to indicate neurological function and brain edema.Results CPH was found to be neuroprotective by restoring neurobehavioral alterations and significantly reducing the elevated PI3K,AKT,and mTOR protein levels,and modulating the apoptotic markers such as Bax,Bcl-2,and caspase-3 in rat brain homogenate.CPH substantially reduced the inflammatory cytokines like interleukin(IL)-1β,IL-6,and tumor necrosis factor-α.CPH administration restored the neurotransmitters GABA,glutamate,acetylcholine,dopamine,and various oxidative stress markers.Conclusion Our results show that CPH may be a promising therapeutic approach for overcoming neuronal damage caused by the overexpression of the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway in ICH-induced neurological dysfunctions in rats.

摘要： 子宫内膜癌的发病率逐年上升,目前的治疗手段以手术为主,放化疗为辅。但对于晚期、复发性或转移性患者效果不佳,尤其是现阶段难以确定子宫内膜癌复发的风险因素,且缺少个性化辅助治疗的可靠依据,故子宫内膜癌常因过度治疗而产生系统毒性。深入研究子宫内膜癌发生发展的内存机制,开发新型替代药物或新靶向药物和个性化治疗方案具有重要意义。在实体瘤中,子宫内膜癌的PI3K/AKT/mTOR通路改变率最高,本文就该通路在子宫内膜癌中的作用机制和靶向本通路的药物研究与临床实验进展作一综述。

摘要： 目的探讨前额叶皮层(PFC)树突棘及突触发育障碍,诱发自闭症(ASD)小鼠核心症状的机制。方法将C57小鼠按照完全随机设计,分为正常对照组(CON组),ASD模型组(VPA组),溶剂对照组(DMSO组)和Wortmannin抑制剂组(Wortmannin组),10只/组。旷场实验,青年玩耍实验和三箱社交实验评价小鼠的ASD样行为;高尔基染色观察小鼠PFC树突棘密度的变化;Western blot检测小鼠PFC信号通路相关蛋白p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR以及突触相关蛋白PSD95、pSyn、Syn的表达;免疫荧光染色观察PSD95、p-Syn的变化。结果与CON组相比,VPA组小鼠出现了ASD样表型,PFC总的、成熟型树突棘密度减少(P<0.05),未成熟型树突棘密度增加(P<0.01),信号通路相关蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR表达上调(P<0.05),突触相关蛋白PSD95和p-Syn/Syn表达下调(P<0.01或P<0.001)。Wortmannin能改善小鼠ASD样表型,改善树突棘发育,下调PI3K/Akt/mTOR信号通路及上调突触相关蛋白的表达。结论 PI3K/Akt/mTOR信号通路的过度激活和突触相关蛋白PSD95、p-Syn表达降低可能导致VPA诱导的ASD小鼠PFC树突棘损伤和突触发育障碍,最终导致ASD样表型。

摘要： 为研究刺五加多糖对抑郁行为的改善作用及机制,将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸氟西汀组(2.1 mg/kg)及刺五加多糖低、高剂量组(60、120 mg/kg),每组10只。采用单笼孤养及慢性轻度不可知应激刺激28 d建立抑郁模型,并从建模第1 d开始灌胃给药。通过敞箱实验、糖水偏好实验及强迫游泳实验评价抑郁行为,苏木精-伊红染色及尼氏染色检测海马组织病理,并比较各组白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、磷酸化磷脂酰肌醇激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinases,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等指标变化情况。结果发现,与正常对照组比较,模型对照组大鼠的水平活动次数、糖水偏好度极显著降低(P<0.01),游泳不动时间极显著升高(P<0.01),且海马组织出现明显病理变化;与模型对照组比较,刺五加多糖低、高剂量组大鼠水平活动次数、糖水偏好度极显著增加(P<0.01),游泳不动时间显著降低(P<0.05、P<0.01),且海马组织结构病理变化得到缓解。同时,与正常对照组比较,模型对照组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA水平极显著增加(P<0.01),CAT、SOD活性及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达极显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,刺五加多糖低、高剂量组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA水平显著降低(P<0.05、P<0.01),CAT、SOD活性及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著增加(P<0.05、P<0.01)。上述结果表明,刺五加多糖具有改善抑郁模型大鼠抑郁行为作用,其机制与调控PI3K/Akt/mTOR通路及抗炎、抗氧化应激作用有关。

摘要： 卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤,死亡率居女性生殖系统恶性肿瘤的首位,确诊多属晚期,手术辅以化疗仍是目前的主要治疗手段。但化疗存在严重的不良反应,预后欠佳。卵巢癌发生、发展中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)信号通路异常激活,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路可提高自噬水平,起到抗肿瘤的作用。自噬抑制剂与抗肿瘤药物联用可增强抗肿瘤效果,可能与抑制PI3K/AKT/mTOR有关,这为研究精准靶向药物治疗卵巢癌提供了思路。现对近年来PI3K/AKT/mTOR介导自噬在卵巢癌治疗中的进展进行综述。

摘要： 本发明公开了一种透明复合式PI膜、含该PI膜的透明复合式PI基板及其制备方法，包括第一铜箔层、抗UV透明聚酰亚胺层、抗UV透明接着剂层和第二铜箔层；所述透明复合式PI膜的光的穿透率88％且雾度1％，通过紫外可见光亮度计测得的L*a*b表色系统的L值为92‑99，a值为‑2.0‑2.0且b值为‑2.0‑2.0，表面硬度4H，CTE30ppm；所述抗UV透明聚酰亚胺层的玻璃化转变温度320°C；所述透明复合式PI膜的厚度为8‑70μm。本发明该基板具有极高的穿透率、极低的雾度、耐QUV照射、高Tg、高挠曲、低反弹力、耐电压和低CTE的基板。

摘要： 本发明提出了一种基于DNA链置换的三维混沌振荡系统PI控制的实现方法，其步骤为：分别确定各个逻辑门的小支点结构及反应过程中辅助物、反应物的DNA链结构，并确定各个DNA链中结构域的碱基序列；基于DNA链置换的反应机制分别构建六种逻辑门，并使用Visual DSD软件对逻辑门电路进行验证；根据生化反应和数学微分表达式之间的转化关系将每个生化逻辑门中对应物种的数学表达式转化为微分表达式并合并，得到三阶混沌振荡系统；利用Matlab软件验证三阶混沌振荡系统的动力学行为；最后，利用基于DNA链置换反应设计的PI控制器分别对三维混沌系统的三个变量进行稳定性控制。本发明构建的混沌振荡系统和基于DNA链置换的PI控制具有合理性和有效性。

摘要： 本申请描述了具有磷酸肌醇‑3‑激酶(PI3K)调节活性或功能的三环化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐，所述化合物具有式I结构且具有本申请所述的取代基和结构特征。本申请还描述了包含式I化合物的药物组合物和药物及单独使用和与其它治疗剂组合使用此类PI3K调节剂以治疗介导或依赖于PI3K失调的疾病或病症的方法。

摘要： 本发明提供了在含水溶剂体系中制备高收率和高纯度的三环PI3K抑制剂化合物的方法。

摘要： 尽管各种改进型PID解决了增益参数难以镇定的问题，然而却增加了计算量。此外，传统PID以及各种改进型PID不仅存在快速性与超调之间的固有矛盾，而且都缺乏抗扰动能力的固有缺陷，因而在实际应用中存在局限性。本发明的一种三相永磁同步电机准PI扰动感知控制方法不仅有效解决了快速性与超调之间的矛盾，而且还具有控制精度高、鲁棒稳定性好、抗扰动能力强、增益参数完全由积分步长来确定等特点。特别是在外部环境发生剧烈变化时也不需要重新镇定控制器的增益参数，有效改进了经典控制理论和现代控制理论的控制策略。本发明对实现三相PMSM的转速控制具有重大的理论意义和应用价值。

摘要： 本发明公开了一种透明复合式PI膜、含该PI膜的透明复合式PI基板及其制备方法，包括第一铜箔层、抗UV透明聚酰亚胺层、抗UV透明接着剂层和第二铜箔层；所述透明复合式PI膜的光的穿透率>88％且雾度4H，CTE320°C；所述透明复合式PI膜的厚度为8‑70μm。本发明该基板具有极高的穿透率、极低的雾度、耐QUV照射、高Tg、高挠曲、低反弹力、耐电压和低CTE的基板。

摘要： 本发明公开了一种制备高性能PI/PI@NaNbO3/PI复合储能材料的方法，涉及材料领域，特别涉及一种储能材料。本发明采用流延成型法制备“三明治”结构的有机无机复合储能材料，既显著提高了材料的机械性能，又大幅提高了材料的介电性能、击穿场强和充放电效率，并且整个制备过程简单，成本低廉。

摘要： 公开了mTOR、MEK、JAK和PI3K的抑制剂以及包含它们的组合物。还公开了使用所述抑制剂治疗多种疾病和病症的方法，其中mTOR、MEK、JAK和PI3K中的一种或多种的抑制提供益处。还公开了使用化学连接部分和接头改变化合物溶解度和/或淋巴吸收的方法。

摘要： 本发明提供了在含水溶剂体系中制备高收率和高纯度的三环PI3K抑制剂化合物的方法。

摘要： 本实用新型公开了一种适用于三合一设备光敏PI无残留出料装置，包括刮料板、弯折过渡杆和加长杆，所述刮料板连接在所述弯折过渡杆的底端，所述弯折过渡杆包括弯折部和连接部，所述连接部为中空结构，所述连接部的顶端通过滑套与所述加长杆的底端连接。本实用新型采用上述结构的一种适用于三合一设备光敏PI无残留出料装置，有效的将设备盲区的树脂通过出料口清理出去，减少浪费，节约成本，使用方便，能够快速方便的调节加长杆的长度。