骨髓间充质干细胞与牙髓细胞共培养细胞特性的体外研究

摘要

目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)与牙髓细胞(DPCs)体外共培养后细胞增殖、分化的生物学特征,探讨采用BMMSCs与DPCs共培养获得牙髓再生组织工程学种子细胞的可行性.方法:分别在体外分离培养大鼠BMMSCs和DPCs,并分别传至第3代.通过成骨及成脂诱导进行BMMSCs鉴定.取第3代DPCs和BMMSCs分为3组,(1)DPCs组;(2)共培养组;(3) BMMSCs组.共培养时间为6d,取出细胞半定量聚合酶联反应检测基质细胞抗原-1(Stro-1)及牙本质涎磷蛋白(DSPP)的基因表达量,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线.结果:①DPCs传至第3代后,细胞形态稳定均一,呈成纤维细胞样,长梭形;BMMSCs传至第3代后,细胞形态稳定均一,呈长梭形,平行排列或呈漩涡状生长,成脂成骨染色阳性.②细胞生长曲线示:共培养组的DPCs较DPCs组先进入指数生长期.共培养组BMMSCs较BMMSCs组后进入指数生长期.③Stro-1的表达量:BMMSCs组表达量最高,共培养组BMMSCs表达量下降;DPCs组表达量最低,共培养组DPCs表达量上升,差异有统计学意义(P =0.000).DSPP的表达量:共培养组DPCs较DPCs组表达量下降;共培养组BMMSCs较BMMSCs组表达量上升,差异有统计学意义(P=0.019).结论:BMMSCs与DPCs共培养,可以促进DPCs的增殖,以及有去分化的趋势;抑制BMMSCs的增殖,具有向DPCs分化的趋势.