吡柔比星与c-myc G4-DNA相互作用的研究

摘要

目的研究吡柔比星与c-mycG4-DNA的相互作用．并探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法采用紫外可见吸收光谱、圆二色光谱（CD）、等温滴定微量量热试验（ITC）、核磁NMR滴定以及荧光能量共振转移（FRET）熔点试验等方法，研究吡柔比星与c-mycG4-DNA的相互作用；采用PCR-Stop方法研究吡柔比星对c-mycG4-DNA复制的抑制。结果在电子吸收光谱中，吡柔比星的特征吸收峰随c-mycG4-DNA浓度的增加出现明显的减色效应和红移，减色率AH=9．2％（△λ=4nm）；根据热力学计算的结合常数K11为1．0×10^4μmol／L；随着吡柔比星的加入pmycG4-DNA的圆二色光谱在265nrn处的信号变化均匀缓慢，在300nm处出现1个负的诱导信号：在吡柔比星作用下，c-mycG4-DNA5＇-末端表面碱基G21-A25发生明显变化，并且熔点升高20．2℃；PCR-Stop试验证实，随着吡柔比星浓度的增加，c-mycG4一DNA的复制能力不断减弱。结论吡柔比星能够以沟槽方式与c-mycG4-DNA相互作用，稳定c-mycG4-DNA四链体结构，并抑制其复制功能．吡柔比星抗肿瘤活性可能与它能够结合并稳定c-mycG4-DNA密切相关。