MyD88在OK-432诱导树突状细胞成熟中的作用

摘要

目的 探讨小鼠骨髓树突状细胞(DCs)髓性分化蛋白88(MyD88)在OK-432诱导DCs 成熟中的作用机制.方法 分离小鼠骨髓单核细胞(BMMCs),在含10%胎牛血清、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)的培养体系中诱导培养,所得的细胞即为DCs.于培养的第5天,将细胞分为3组:对照组不加OK-432和MyD88 siRNA;OK-432组加入终浓度为5 μg/mL的OK-432;RNA干扰组加入MyD88 siRNA 12 h后,再加入5 μg/mL OK-432刺激.半定量RT-PCR法检测DCs中MyD88的表达;ELISA法检测各组DCs分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-12的能力;MTT法检测DCs体外刺激同种混合淋巴细胞增殖的免疫活性.结果 OK-432组DCs的MyD88高表达、TNF-α和IL-12释放明显增加并能诱导较强混合淋巴细胞反应,而用MyD88 siRNA干扰后以上效应均降低(P＜0.05).结论 靶向MyD88 siRNA可明显抑制小鼠DCs中MyD88的表达和OK-432诱导的DCs成熟,表明MyD88介导OK-432诱导的DCs成熟.