浅论荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR检测G Ⅰ、G Ⅱ型诺如病毒比较研究

摘要

本文通过荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR,分别对191例临床粪便样本进行GⅠ、GⅡ型诺如病毒的快速检测,优化反应条件,筛选出最优反应体系,对两种方法的特异性、灵敏性进行检测分析.发现两种方法均可较好的检测出GⅠ、GⅡ型诺如病毒.其中常规RT-PCR阳性样本数为142,检出率为74.34％,最低检出限为103copies/μl,标准曲线均呈现出良好的线性关系,扩增效率分别为101.336％、103.558％;荧光定量RT-PCR的阳性样本为163,检出率为85.34％,最低检出限为102copies/μl,批内、批间重复试验的标准差范围为0.10 ～ 0.59,变异系数范围为0.43％ ～ 2.84％,重复性良好.两种方法检出率有显著差异(P＜0.05),且对星状病毒、腺病毒以及肠道病毒等均无交叉反应,GⅠ、GⅡ型诺如病毒之间也无交叉反应.荧光定量RT-PCR在灵敏度方面占优,建议在临床检测中应用.