实时RT-PCR检测大鼠死后管家基因mRNA的时序性降解

摘要

目的 研究实时荧光定量RT-PCR方法检测死亡大鼠管家基因mRNA时序性降解的可行性,为死亡时间(postmortem interval,PMI)推断寻找新的研究手段. 方法应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR技术,检测死后不同时间大鼠脑和脾中管家基因GAPDH mRNA及β-actin mRNA的水平,结果用循环阈值(简称Ct值)表示,分析死后经过时间与Ct值的线性关系,并建立死亡时间推断回归方程.结果 GAPDH mRNA和β-actin mRNA的Ct值均与PMI之间存在显著的相关性. 结论SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR在定量分析mRNA降解的研究中是一个较理想的技术手段.选用管家基因作为PMI推断的研究对象,可在法医检案中消除其他基因因为个体差异带来的误差,更具实用性.Ct值作为动态监测机体死后不同时间点的客观指标,与死后不同时间点的线性关系良好,推断死后经过时间尤其是晚期死亡时间较为理想.