烟草节杆菌肌酸酶的高效异源表达与应用分析

摘要

肌酸酶(CRE)是临床检测血液和尿液中肌酐的关键酶之一.作者成功地从烟草节杆菌23710 (Arthrobacter nicotianae 23710)中克隆了CRE基因,并实现了CRE在Escherichia coli BL21 (DE3)中的表达.经过硫酸铵分级沉淀、阴离子交换色谱、分子筛后得到了较纯的重组CRE,比酶活达到了20.25 U/mg.重组CRE对于螯合剂EDTA、表面活性剂(Tween20,和Triton X-100)以及常用的防腐剂NaN3有很好的耐受性.