肌酐测定工具酶产生菌-烟草节杆菌02181的筛选及其产酶条件

摘要

肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶是肌酐测定酶学方法的主要工具酶,我们从兰州市郊土壤中筛选到一株能同时高产这3种酶的菌株02181,经中国科学院微生物研究所鉴定为烟草节杆菌,正式定名为烟草节杆菌02181(Arthrobacter nicotianae 02181).该菌适宜的培养温度为28℃;增加氧溶量有利于细菌细胞生长和产酶;肌酐的存在对产酶至关重要,推测为酶基因开放的诱导剂;蛋白胨是该菌生长和产酶的良好氮、碳源;在有肌酐和蛋白胨存在时,添加葡萄糖能促进细菌细胞生长,但产酶量降低;镁盐、钾盐和磷酸盐为细菌生长和产酶所必需.优化产酶条件后,肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶的最高产酶量分别达145.00 U/g湿菌、75.77 U/g湿菌和21.30 U/g湿菌.该菌不仅具有用于发酵生产的潜力,也为我们进行肌酐测定3种主要工具酶的基因克隆奠定了基础.