信号肽对Bacillus subtilis表达环糊精葡萄糖基转移酶的影响

摘要

将来源于作者所在实验室构建保存E.coli pET-20b (+)/CGTΔE-CBMAmy的CGTΔE-CBMAmy基因插入6种含有不同信号肽(estA、bpr、vpr、yncM、yvgO和ywbN)的穿梭质粒pMA0911-SPs中,构建了6种重组表达载体并将其转入表达宿主B.subtilis WB600中,获得了6株重组菌.在相同的发酵条件下,estA信号肽介导的分泌效果最好,L-抗坏血酸2-葡萄苷产量达到0.81 g/L,明显高于其他5株重组菌.选取WBpMB/CGTΔE-CBMAmy作为出发菌株,进行了摇瓶发酵条件优化,实现了CGTΔE-CBMAmy酶的高效表达,最终使AA-2G产量提高了2.16倍,VC转化率达到21.9％.