Bacillus sp.Y112环糊精葡萄糖基转移酶位点R81定点突变提高产物特异性

摘要

通过对来源于海洋芽孢杆菌Y112的环糊精葡糖基转移酶进行同源建模及氨基酸序列比对,发现N末端81位精氨酸可能影响环糊精产物特异性.本研究通过定点突变将第81位点处的精氨酸突变为苏氨酸,降低了α-环糊精的生成量,将β-环糊精的比例从64％上升至71％,提高了产物的专一性.分析原因可能与取代氨基酸残基的大小及氢键作用力的变化有关.同时,突变酶的酶学性质方面保持了原始酶的嗜热性、热稳定性及耐碱性.