珠江口水产源乳酸菌资源库的构建及优良乳酸菌的高通量筛选

摘要

目的 构建珠江口水产养殖动物源的乳酸菌资源库,开发一套较为完善的高通量筛选优良乳酸菌的方法.方法 采集珠江口水域多种水产动物的肠道,研磨,稀释涂布于含溴甲酚紫及碳酸钙的MRS平板上,挑取有溶钙圈的单菌落,进行过氧化氢酶实验以排除产气菌.提取细菌的基因组作模板,PCR扩增16S rDNA基因,根据测序结果进行同源性比对分析确定乳酸菌的种属,建立乳酸菌库.进一步借助96孔板培养技术,将乳酸菌与水产致病菌(指示菌)混合培养,根据对指示菌的抑菌效果,确定具有优良抑菌活性的乳酸菌.结果 从水产动物肠道中筛选出乳酸菌14属71种1638株,获得了15株对常见水产养殖致病菌(嗜水气单胞菌、创伤弧菌、副溶血弧菌等)具有高效广谱抑制效果的菌株.结论 本研究建立的乳酸菌菌种资源库,弥补了国内目前水产养殖来源乳酸菌菌株储备缺乏的现状,有望提供各类性能优良菌株用于渔业、畜牧业和食品生产.