海湾扇贝Dmrt1基因分子特征及功能分析

摘要

利用PCR技术和生物信息学方法获得了海湾扇贝(Argopecten irradians irradians) Dmrt1基因(AiDmrt1)的cDNA序列.采用实时定量PCR技术确定AiDmrt1在不同组织、性腺发育阶段及胚胎和幼虫发育阶段的表达模式,并结合RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲降AiDmrt1表达后检测了精巢中性腺发育相关基因的表达特征.结果 显示,AiDmrt1开放阅读框长度为918 bp,编码305个氨基酸,其编码蛋白具有保守的DM结构域.AiDmrt1的mRNA在精巢中特异性表达,在精巢发育至生长期阶段表达水平最高.AiDmrt1在囊胚期前表达量无显著差异,但在原肠期表达水平极显著升高(P＜0.01).敲降ADmrt1表达后,精巢发育相关基因Sox7、Sox11和Fem-1显著或极显著上调表达(P＜0.05或P＜0.01),而Dmrt4的表达显著下调(P＜0.05);卵巢发育相关基因FoxL2、Wnt4、β-catenin GATA-1和GATA-3均显著或极显著上调表达(P＜0.05或P＜0.01).研究结果表明,AiDmrt1是海湾扇贝精巢特异性表达基因,参与调控海湾扇贝性腺发育与分化.