鲤生长激素酵母工程菌的分泌表达和产物纯化

摘要

取本室构建的鲤生长激素毕赤酵母工程菌GS115(pPICZαA-GH),甲醇诱导,SDS-PAGE检测,证明重组鲤生长激素(Recombinant Carp Growth Hormone, rcGH)在酵母中得到分泌表达.重组酵母菌生长曲线显示,细胞从培养第8小时进入对数生长期,至32 h OD660升至峰值11.5,此后OD660缓慢下降.在以100%甲醛按0.5%添加量诱导至72 h、pH为6.0时,rcGH表达量最高.凝胶扫描分析,分泌表达的rcGH占上清总蛋白的36.41%,表达量为300～400 mg/L发酵液.经离子交换层析法纯化表达产物,纯度可达95%.纯化的rcGH注射奥尼罗非鱼,结果表明具有明显的促生长作用.