三角帆蚌微卫星富集文库的构建、鉴定及多态性分析

摘要

通过磁珠富集法构建了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)微卫星富集文库.共获得800个阳性克隆,其中的100个阳性克隆经测序分析,共获得微卫星序列54个.利用这些微卫星序列可设计33对引物,经过PCR扩增筛选获得了25对可用引物.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对洞庭湖1个种群的30只三角帆蚌进行扩增,发现13对引物呈现多态性,等位基因数在4～9.观测杂合度在0.2543～0.9827,期望杂合度在0.3629～0.8217,信息多态含量平均为0.5198.由于存在无效等位基因,两个微卫星基因座(GenBank登录号为GQ302651和GQ302658)明显地偏离哈代-温伯格平衡,但没有发现连锁不平衡现象.这说明利用磁珠富集法构建的三角帆蚌微卫星文库质量较好,13对多态性微卫星引物可为三角帆蚌微卫星连锁图谱构建、分子进化和系统发育研究、分子标记辅助育种以及经济性状的QTL,定位提供帮助.