小鼠骨髓间充质干细胞对胚胎干细胞造血分化的影响

摘要

骨髓间充质干细胞作为骨髓基质细胞的前体细胞,在体外具有一定的造血支持作用,与造血干细胞共移植可促进其植入.本研究旨在初步探讨应用小鼠骨髓间充质干细胞与胚胎干细胞共培养作为一种新的分化体系的可行性.首先分离、培养并鉴定小鼠骨髓间充质干细胞,然后利用扩增培养的骨髓间充质干细胞与胚胎干细胞共培养,通过造血集落培养和RT-PCR观察造血分化的特点.结果表明,分离、扩增培养至第四代之后的骨髓间充质干细胞形态均一,高表达Sca-1,CD29,CD44和CD105,而CD34和CD45等造血与内皮细胞特异性表面标志呈阴性;特异性诱导体系内传代后(>4代)的骨髓间充质干细胞可向脂肪细胞和成骨细胞分化.与悬浮分化体系相比,骨髓间充质干细胞共培养体系中初始分化的胚胎干细胞含有显著增加的拟胚体形成细胞而没有造血集落形成细胞.此外,RT-PCR检测发现:共培养细胞表达胚胎干细胞特异性转录因子Oct-4,而造血标记Flk-1, GATA-1和β-H1为阴性.结论:间充质干细胞在一定程度上抑制了胚胎干细胞的初始分化,但是共培养体系来源的拟胚体产生造血集落的能力显著高于悬浮体系.