间充质干细胞对脐血CIK/NK细胞CD69表达及培养体系中T调节细胞量比的影响

摘要

本研究通过Transwell细胞隔离培养体系探讨骨髓源间充质干细胞(MSC)对脐血(CB)来源细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)/自然杀伤细胞(NK)CD69的表达以及对培养体系中CD4+CD25+ T调节(T reg)细胞量比的影响.利用聚碳酯膜孔径0.4 μm的Transwell隔离细胞培养系统将实验组分为隔离培养(Transwell)组和直接混合(mix-ture)培养组;将MSC和CIK/NK细胞按1:20、1:50和1:100的比例分别在Transwell组和mixture组中进行隔离和直接混合培养,每组6个重复孔;培养48小时后通过流式细胞术检测各组CIK/NK细胞上CD69的表达以及培养体系中CD4+ CD25+ 细胞量比的变化.结果显示:加入MSC的实验各组CB-CIK细胞和NK细胞上表达的CD69比例均显著低于对照组(P值均<0.001).Transwell组中的CIK和NK细胞上表达的CD69,在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组),其中CIK细胞组间的P值分别为0.046、0.020;NK细胞组间的P值均为0.000.mixture组中不同比例组间CIK细胞上表达的CD69无显著性差异,而NK细胞上CD69的表达在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组).加入MSC的CB-CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比不论在Transwell还是mixture组中均显著高于对照组(P值均<0.01);在Transwell组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+ CD256+ 细胞的量比在1:20组、1:50组均显著高于1:100组;在mixture各组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+ CD25+ T调节细胞的量比均有显著性差异.MsC的高浓度组(1:20组),CIK/NK细胞体系中的CIM+ CD25+ 细胞量比在mixture组显著高于Tranawell组;而在MSC的低浓度组(1:50组和1:100组),2组体系中的CD4+ CD25+ 细胞量比无显著性差异.结论:MSC能以直接接触或间接作用的方式抑制异基因CIK/NK细胞的活化,这可能与MSC能上调培养体系中的CD4+ CD25+ T reg细胞量比有关,且这种作用与MSC的数量呈浓度依赖关系.