CpG ODN 2216对白血病缓解期患者外周血单个核细胞的活化能力及活化的细胞对K562细胞的杀伤作用

摘要

本研究探讨CpG ODN 2216对白血病缓解期患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNC)的活化能力以及CpG ODN 2216活化的PBMNC对白血病细胞K562的杀伤作用.取白血病缓解期患者外周血,以淋巴细胞分离液(Ficoll)分离PBMNC,用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液调整PBMNC浓度为2.0×106/ml.对照组加入生理盐水(NS),实验组加入CpG ODN 2216,培养1周,提取上清,用ELISA检测上清中IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10的水平.取白血病缓解期患者外周血,分离PBMNC,对照组加入生理盐水,实验组加入CpG ODN2216,培养48小时,用流式细胞仪检测PBMNC中淋巴细胞的Th1/Th2,Tc1/Tc2细胞比例;流式细胞术检测活化的PBMNC对肿瘤细胞K562的杀伤能力.结果表明:实验组上清中IFN-γ、IL-12水平与对照组相比有显著差异(P<0.01);IL-4、IL-10水平与对照组相比无明显差异(P>0.05).CpG ODN 2216能刺激白血病缓解期患者PBMNC向Th1/Tcl转化,与对照组相比有显著差异(P<0.01),但对Th2/Tc2无明显的刺激作用(P>0.05).CpG ODN 2216活化的PBMNC对K562细胞的杀伤能力明显高于对照组(P<0.01).结论:CpG ODN 2216可在体外诱导白血病缓解期患者PBMNC分泌Th1型细胞因子,诱导PBMNC向Th1方向转化,并强烈地活化CD8+T细胞应答.CpGODN 2216活化的PBMNC对白血病细胞K562具有较强的杀伤作用.