体外联合应用CD80和CD28/CpG ODN共刺激活化人外周血单个核细胞:对胃癌细胞株MKN45有靶向杀伤作用吗?

摘要

背景:启动维持并调节活化级联反应,决定了T细胞是活化增殖或转变为无反应状态甚至凋亡.B7分子与CD28的结合能有效协同T细胞受体途径活化T细胞,增强T细胞的增殖活性. 目的:初步分析CD80和CD28/含CpG的寡脱氧核苷酸(CpG containing oligodeoxynucleotides,CpG ODN)共刺激活化的人外周血单个核细胞对胃癌细胞株MKN45的杀伤作用.方法:Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入白细胞介素2及CD28,CpG ODN共刺激活化培养1～5 d.取MKN45细胞,设立4组:CD28/CpG ODN共刺激组、CD80联合CD28/CpG ODN共刺激组、单纯CD80组、空白对照组.以MTT法检测细胞杀伤率,电镜观察凋亡的MKN45细胞超微结构,流式细胞仪检测MKN45细胞凋亡率.结果与结论:单纯CD80组对MKN45细胞无明显杀伤作用;与CD28/CpG ODN共刺激组比较,CD80联合CD28/CpG ODN共刺激组对MKN45细胞的杀伤作用显著增强(P < 0.05),效应细胞与靶细胞之比达15︰1时即可达到半数杀伤率.电镜下效应细胞作用24 h,MKN45细胞就部分发生坏死,部分细胞可见凋亡.与空白对照组比较,单纯CD80组MKN45细胞凋亡率显著升高(P < 0.01).提示CD80与共刺激活化的外周血单个核细胞合用,可提高活化的外周血单个核细胞对MKN45细胞的靶向性杀伤作用.