慢病毒载体转染人骨髓间充质干细胞后其分化潜能的研究

摘要

本研究探讨携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体(lentiviral vector,LV)转染人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)后的分化能力.从骨髓中分离、培养MSC,通过携带EGFP标记的慢病毒载体体外转染人MSC,观测绿色荧光蛋白的表达情况.最后,应用成脂诱导培养基(胰岛素、吲哚美辛、甘油-3-磷酸酰基转移酶IBMX、地塞米松)定向诱导分化已转染的MSC为脂肪细胞,苏丹黑染色观察诱导情况.结果表明,转染72小时后的MSC在荧光显微镜下显现弱荧光;经脂肪诱导培养基培养21天后在显微镜下可观察到细胞胞浆内形成高度折光性的脂滴,苏丹黑染色呈橘红色,且转染组与未转染组差异不大(P>0.05).结论:成功应用携带EGFP基因的慢病毒载体对MSC进行基因修饰,使转染后的MSC仍具有分化能力,能被诱导为脂肪细胞.MSC可作为基因治疗的一种靶向性细胞.