血液和骨髓标本中常见PCR反应抑制物的探究与分析

摘要

PCR反应具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、高效安全及对标本要求低的特点,是检测标本中DNA或mRNA的首选方法,大量应用于临床和科研.近年来逆转录荧光定量PCR技术(real-time reverse transcription PCR,qRT-PCR)取得了飞速发展,检测灵敏度不断提高,有的甚至可以检测低于10个拷贝数的基因.技术的进步必然会对标本提出更高的要求,因此有必要重新审视血液和骨髓液中可能存在的PCR反应抑制物.本文总结了血液和骨髓液中常见的PCR反应抑制物及其可能存在的抑制机制和解决措施,重点阐述了抗凝剂肝素的使用对于PCR反应的影响.本文可在一定程度上指导对PCR(特别是qRT-PCR)检测结果的评估,如对于某些低表达基因定量检测结果临床意义的判断,或者排除标本中PCR抑制成分所导致的假阴性等.