兔角膜上皮细胞短时暴露试验的影响因素

摘要

目的观察兔角膜上皮细胞短时暴露试验(short-term exposure test,STE test)的影响因素。方法兔角膜上皮细胞分别按3×10^3和6×10^3细胞/孔的初始密度接种,苯扎氯胺等12种化学物质分别以5%和0.05%剂量对细胞染毒5 min后,采用MTT法和CCK-8法显色,计算细胞存活率,采用传统法和STE积分法对上述化学物质的眼刺激性进行评价。结果以3×10^3细胞/孔和6×10^3细胞/孔两种密度接种的细胞,染毒后细胞存活率结果相关性显著。MTT和CCK-8两种显色法测定的细胞存活率结果相关性显著。传统法和STE积分法两种判定标准对重度眼刺激性物质和轻微眼刺激性物质分级判断结果一致。结论细胞初始接种密度、不同显色方法和结果判定标准是兔角膜上皮细胞短时暴露试验结果的影响因素,可采用3×10^3细胞/孔或6×10^3细胞/孔作为试验初始接种密度,采用CCK-8法测定细胞活性,STE积分法判定受试物对眼的刺激强度。