烟粉虱体内木尔坦棉花曲叶病毒的LAMP快速检测技术

摘要

木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl Multan virus,CLCuMuV)是引起世界范围内棉花曲叶病流行的主要病原之一,目前已入侵我国广东、广西、海南、福建、云南等地区.该病害由烟粉虱传播,随着烟粉虱扩散范围增加、危害不断加重,棉花曲叶病对我国棉花生产的潜在危害也日益增加.加强该病毒传播介体携带病毒的快速、特异性检测技术研发,对该病害的有效检疫与防控具有重要意义.本研究基于木尔坦棉花曲叶病毒(CLCuMuV)的基因序列设计出LAMP检测4条特异性引物,建立LAMP扩增体系并优化扩增条件,扩增试验证明引物组合的特异性高,LAMP检测所需时间短,仅29 min即可定性检测CLCuMuV扩增产物;该方法较普通PCR的扩增灵敏度高,可用于检测1头烟粉虱体内是否携带CLCuMuV,简便易行,只通过颜色变绿或浊度变浑浊即可定性判断.建立的LAMP检测技术可被用于苗木上烟粉虱携带CLCuMuV的早期检测,为介体昆虫带毒的检疫监测提供一种快速、准确和易操作的新技术.