猪三种不同直径卵泡中颗粒细胞的比较研究

摘要

为探究不同直径有腔卵泡中猪卵巢颗粒细胞的生理机能差异,以期为后续生殖毒理学研究奠定基础.采用剖剪法获取猪卵巢内三种直径范围的有腔卵泡(小型＜2 mm,中型2～5 mm,大型≥5 mm)并获得颗粒细胞,台盼蓝染色方法计算细胞存活率,倒置显微镜下观察细胞形态并计算细胞纯度,实时定量方法检测促卵泡刺激素受体基因(FSHR)及促黄体生成素受体基因(LHR)的表达进一步鉴定颗粒细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线.结果显示从大中小三种不同直径有腔卵泡中获得的猪卵巢颗粒细胞存活率分别为68％、75％、72％,纯度分别为97％、95％、90％;细胞生长曲线表明,从24 h开始进入对数生长期,并于120 h达到最大值,且中型卵泡中获得的颗粒细胞生长增殖状态最佳;实时定量结果显示FSHR在猪三种直径的有腔卵泡颗粒细胞中均表达阳性,且呈现差异.