miR-195靶向MYB激活PI3K-Akt通路调控皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移

摘要

目的:探讨微小RNA 195(miR-195)对皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移的影响及其机制.方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-195和MYB基因在皮肤鳞癌细胞(A431细胞)和人正常皮肤细胞(HaCaT细胞)中的表达.CCK-8实验检测过表达及下调miR-195对A431细胞增殖能力的影响;Western blot检测过表达及下调miR-195对A431细胞凋亡相关蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达的影响;Western blot分析过表达及下调miR-195对A431细胞上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响.TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-195和MYB之间的关系,分析下调MYB对A431细胞增殖和EMT的影响.Western blot检测过表达MYB后对PI3K-Akt通路的影响.LY294002作用细胞后,检测过表达MYB对A431细胞增殖和EMT的影响.结果:与HaCaT细胞相比,A431细胞中miR-195表达明显下调(P<0.01),MYB表达明显上调(P<0.01).过表达miR-195抑制A431细胞增殖与EMT,促进细胞凋亡,下调miR-195则起到相反作用;miR-195和MYB具有靶向和负调控关系;下调MYB的表达抑制A431细胞增殖与EMT;过表达MYB激活细胞内PI3K-Akt通路,且通过该通路促进A431细胞增殖与EMT.结论:miR-195通过靶向MYB激活PI3K-Akt通路调控A431细胞的增殖和转移.