猪生长激素基因在金鱼中的整合、表达与生物活性

摘要

自Palmiter于1982年首次将大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵，培育出“超级鼠”以来，转基因动物技术获得迅速发展。本文以低等脊椎动物为实验动物，探讨猪生长激素基因导入金鱼受精卵后的整合与表达、生物学效应及后代遗传等问题，为进一步研究外源基因在高等脊椎动物（包括猪）内整合与表达的调鬼斧神工机理提供方法上的参考。实验结果表明：采用显微注射方法，将羊金属硫蛋白基因启动子与猪生长激素基因重组的线型DNA（Fig.1)片段导入金鱼受精卵中，获得成活实验鱼，经斑点（Fig.2)，Southern杂交（Fig.3)，筛选PGH阳性的转基因鱼作为亲本交配，分别得到F1代和F2代。经斑点PCR－Southern分析（Figs,4,5&6)及放射免疫检测（Tanb.1)，表明外源基因在部分受体鱼中得到整合和表达，并能通过有性繁殖传递给后代，且仍具生长效应(Fig．7；Tab.2）。本实验获得的转基因阳性金鱼数量有限，且只传了两代，似乎不足以说明转基因金鱼后代表观特征的遗传稳定，但转基因金鱼F1代中存在外源基因整合位点纯合的个体是可能的。这为建立转基因动物纯系奠定了基础。