金鱼生长激素Ⅱ基因在杆状病毒中的表达

摘要

以ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３为转移载体，将编码金鱼生长激素Ⅱ的ｃＤＮＡ插入粉纹夜蛾核型多角体病毒（ＴｎＮＰＶ）基因组中，构建了重组病毒株ＴｎＮＰＶＳＸ＋ｇｆＧＨⅡ４６。该毒株能在草地贪夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）离体培养细胞及银纹夜蛾（Ａｇｙｒｏｇｒａｍｍａａｇｎａｔａ）幼虫中表达金鱼生长激素基因。蛋白免疫印迹表明，表达的生长激素蛋白分子量为２２．５ｋＤａ，与理论计算值相符，且表达的生长激素可分泌到感染细胞的培养基及虫体血淋巴中。ＲＩＡ结果表明，表达产物与天然的生长激素有相似的免疫特性，重组病毒在感染细胞９６ｈｐｉ所表达的生长激素达到最高水平，平均每１０５个细胞可在细胞培养基中检测到金鱼生长激素Ⅱ达８６．７４ｎｇ；平均每克干虫可产生金鱼生长激素Ⅱ２１４μｇ。