错配杂交化学发光法检测MTHFR基因多态性

摘要

目的 建立一种基于错配杂交及化学发光技术检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase,MTHFR) 基因多态性的新方法.方法 针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补.将2条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,根据2条探针的发光值之比确定样品的基因型.结果 用本法随机检测50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致.结论 本方法操作简便、快速且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测.