定量检测残留白细胞方法的建立及在辐照血小板中的应用

摘要

目的建立定量检测单采血小板中残留白细胞的流式细胞术方法,探讨经血液辐照仪辐照前后血小板中白细胞的含量变化.方法应用绝对计数管内的定量微球(Beads)调整流式细胞仪参数,确定流式细胞仪检测条件.血小板样品经过RNA酶、固定剂、渗透剂作用后,再经碘化丙啶标记,通过流式细胞仪计数经标记的白细胞,建立检测残留白细胞含量的方法.采用血细胞分离机采集单采血小板16人份,通过血液辐照仪25 Gy照射310 s,应用建立的流式细胞术方法跟踪检测单采血小板辐照前及辐照后0、1、3、5 d的白细胞含量,比较白细胞含量的变化.结果单采血小板中残留白细胞含量范围为1.85×106～1.3×108/袋.单采血小板中残留白细胞计数于辐照前与辐照后0 d相比没有变化,与辐照后1 d相比残留白细胞数量的减少有显著性(P＜0.05);辐照后1 d白细胞计数与辐照后3 d和5 d相比没有改变.结论流式细胞术方法具有较好的准确性、客观性和重复性,可以成为评估血小板质量的监控手段.辐照不立即改变血小板中残留白细胞的计数,辐照后1 d残留白细胞的数量减少.