大鼠脂肪间充质干细胞分离培养及成骨潜能的试验研究

摘要

[目的]研究大鼠脂肪间充质干细胞分离培养的方法和成骨分化的潜能.[方法]取大鼠腹股沟脂肪垫,酶消化法分离细胞,接种入含新生牛血清的DMEM培养基进行原代培养,用含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的DMEM培养基诱导其成骨分化.倒置显微镜、光学显微镜、透射电镜观察细胞形态,测定细胞倍增时间,检测碱性磷酸酶染色、钙结节染色.[结果]脂肪间充质干细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,倍增时间为35 h,传代稳定;经成骨诱导,细胞呈多角形,体积明显增大,倍增时间为68 h.Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色显示其胞浆内含碱性磷酸酶颗粒,阳性率为80%;茜素红S染色见钙结节形成.[结论]成功地建立了一种分离、培养大鼠脂肪间充质干细胞的方法;经成骨诱导,其具有成骨的潜能,可作为骨组织工程的种子细胞.