LPS对脑血管内皮细胞通透性的影响及其PKC-α/RhoA调控途径研究

摘要

[目的]阐明PKC-α/RhoA信号途径在LPS致脑血管内皮细胞通透性升高过程中的调控作用.[方法]利用Pull Down和体外酶学实验分别检测LPS对PKC-α、RhoA活化作用,转染抑制性质粒N19RHOA和小干扰RNA-PKC-α分别抑制PKC-α、RhoA活化,并通过F-actin染色、Western Blot和免疫荧光技术分别检测抑制PKC-α、RhoA活化后LPS致紧密连接(TJ)破坏作用的变化.分别比较抑制RHOA后LPS对PKC-α活化能力的作用及抑制PKC-α后LPS对ROHA活化能力的作用以了解上述2个信号的相互调控关系.[结果]LPS作用5 min,PKC-α、RhoA均能活化,抑制PKC-α、RhoA活化可明显改善LPS导致的TS蛋白下调及细胞骨架重组作用,上述过程中,PKC-α为RhoA的上游调控信号.[结论]LPS通过PKC-α/RhoA信号途径促使脑血管内皮细胞TJ开放,通透性升高.