腺病毒介导的IL-24基因转移对系膜细胞分泌细胞因子IL-6、TNF-α的影响

摘要

目的 探讨腺病毒介导的白细胞介素24 (interleukin-24,IL-24)基因转移对系膜细胞分泌细胞因子白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6、TNF-α的影响.方法 通过逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法构建IL-24腺病毒载体,并经序列分析证实.腺病毒载体在293细胞中扩增.分组培养系膜细胞:对照组为5％ DMEM(dulbcco's modified eagle's medium)培养肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMCs);Ad.Ib24组为转染携带IL-24基因复制缺陷型腺病毒(Adenovirus.interleukin-24,Ad.IL-24)后用5％ DMEM培养肾小球系膜细胞,分别在24 h和48 h提取系膜细胞培养上清.用ELISA方法检测系膜细胞培养上清液中IL-6、TNF-α的表达.结果 ①对照组系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的IL-6表达分别为(159.53±9.81) pg/ml和(125.78±4.61) pg/ml,Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的IL-6表达分别为(812.56±7.21) pg/ml和(785.44±6.23) pg/ml.Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的IL-6表达均明显高于对照组(P＜0.05).②对照组系膜细胞培养上清液24 h和48 h中的TNF-α表达分别为(29.37±2.43) pg/ml和(26.35±3.04) pg/ml,Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的TNF-α表达分别为(30.18±2.03) pg/ml和(28.16±2.35) pg/ml.Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的TNF-α表达与对照组无统计学差异(P＞0.05).结论 外源性IL-24基因转移可使系膜细胞分泌IL-6上调,而对系膜细胞分泌TNFα无明显影响.