单酰甘油脂肪酶对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的影响及其机制

摘要

目的 探讨单酰甘油脂肪酶(MAGL)在人肝细胞癌(HCC)裸鼠移植瘤生长中的作用和机制.方法 移植的SMMC-7721细胞株分为SMMC-7721 WT组(未处理)、SMMC-7721 MAGL-KD组(MAGL沉默)、SMMC-7721 MAGL-OE组(MAGL过表达)和SMMC-7721 Vector组(空载体转染)4组.将27只雄性BALB/c裸鼠分为4组建立裸鼠皮下移植瘤模型,即A组(注射SMMC-7721WT组细胞株,n=12)、B组(注射SMMC-7721MAGL-KD组细胞株,n=5)、C组(注射SMMC-7721MAGL-OE组细胞株,n=5)及D组(注射SMMC-7721Vector组细胞株,n=5),其中A组又分为A1(正常饲喂,n=4)、A2[(高脂饲喂(HFD)+JZL184(MAGL的特异性抑制剂,n=4)和A3(HFD饲喂,n=4)3个亚组.观察并比较4组肿瘤体积变化,瘤体内增殖细胞核抗原(PCNA)、金属基质蛋白酶(MMP)2、血浆溶血性磷脂酸(LPA)和前列腺素E2(PGE2)的表达水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验.结果 MMC-7721WT组、SMMC-7721MAGL-KD组、SMMC-7721MAGL-OE组3组间MAGL蛋白相对表达水平比较差异有统计学意义(0.377±0.026 vs 0.182±0.055 vs 0.689±0.019,F=33.382,P<0.001),SMMC-7721MAGL-KD组MAGL蛋白表达水平显著低于SMMC-7721WT组(P<0.05),SMMC-7721MAGL-OE组显著高于SMMC-7721WT组(P<0.05);A、B、C、D 4组间裸鼠皮下移植瘤大小比较差异有统计学意义[(4236.125±1284.283)mm3 vs(1883.375±552.977)mm3 vs(10146.061±1842.264)mm3vs(4307.452±2070.708)mm3,F=6.804,P=0.023],C组的裸鼠皮下移植瘤的生长速度比A组更快(P<0.05),而B组比A组慢(P<0.05);A、B、C 3组间PCNA和MMP2水平比较差异均有统计学意义(PCNA:25843.821±4201.310 vs 17426.95±5139.202 vs 39753.103±5721.444,F=21.482,P<0.001;MMP2:52841.621±4339.253 vs 35511.451±8251.423 vs 68274.731±6418.594,F=11.526,P<0.001),B组PCNA和MMP2水平均明显低于A组(P值均<0.05),而C组均高于A组(P值均<0.05);A1、A2、A33组间肿瘤体积比较差异有统计学意义[(23476.289±483.872)mm3 vs(18593.851±1385.805)mm3 vs(37703.198±2925.254)mm3,F=47.371,P=0.004],与A1组相比,A3组的裸鼠皮下移植瘤体积增长速度更快(P<0.05),A2组明显受到抑制(P<0.05);A1、A2、A33组间PGE2水平比较差异有统计学意义[(0.109±0.023)μmol/L vs(0.056±0.010)μmol/L vs(0.168±0.024)μmol/L,F=16.492,P<0.001],A3组PGE2水平明显高于A1组(P<0.05),A2组明显低于A1组(P<0.05);B、C、D 3组间PGE2水平比较差异有统计学意义[(0.069±0.025)μmol/L vs(0.175±0.023)μmol/L vs(0.096±0.019)μmol/L,F=31.550,P<0.001],B组PGE2水平明显低于D组(P<0.05),C组明显高于D组(P<0.05).结论 MAGL可能通过调控PGE2促进裸鼠HCC皮下移植瘤的生长,提示MAGL可能成为未来治疗HCC的潜在靶点.