细胞外信号调节激酶1/2通路抑制剂PD98059对体外培养γδT细胞增殖和杀伤功能的影响

摘要

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK) 1/2信号通路抑制剂PD98059对体外培养人γδT细胞增殖和杀伤功能的影响.方法 从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到含有唑来膦酸和白细胞介素2的RPMI 1640完全培养基中诱导培养获得γST细胞.用ERK1/2特异性抑制剂PD98059阻断γδT细胞ERK1/2信号通路后,用细胞计数仪测定γ8T细胞增殖和细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定杀伤能力;采用流式细胞术检测γδT细胞颗粒酶B和穿孔素的表达.计量资料组间比较采用t检验.结果 培养10 d后的γδT细胞纯度达到(87.94±2.36)％.PD98059作用后的γδT细胞数低于对照组[(6.74 ±0.36)×105/ml vs(9.42±0.31)×105/ml],而PD98059作用后γδT细胞颗粒酶B阳性表达率[(48.89±1.31)％vs(41.58±1.58)％]、穿孔素阳性表达率[(65.92±3.29)％vs(33.49±2.83)％]、对肝癌HepG2细胞的杀伤率[(69.28±4.96)％vs(48.34±3.01)％]均高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为-12.708、7.582、15.478、11.201,P值均＜0.001).结论 ERK1/2特异性抑制剂PD98059阻断ERK1/2信号通路能抑制γδT细胞的增殖,但能增强γδT细胞的体外杀伤功能.