糖原合成酶激酶3β在糖尿病减弱七氟醚后处理心肌保护中的作用

摘要

目的 通过糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的过表达,探讨其在糖尿病减弱七氟醚后处理心肌保护中的作用.方法 2月龄健康清洁级雄性SD大鼠60只,体重200～300 g,采用随机对照法分为五组:假手术组(Sham组)、正常大鼠IR组(NI组)、正常大鼠IR+七氟醚后处理组(NS组)、糖尿病大鼠缺血-再灌注(IR)+七氟醚后处理组(DS组)、正常大鼠GSK-3β过表达+IR+七氟醚后处理组(GS组),每组12只.采用腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)60mg/kg的方法制备糖尿病大鼠模型.采用左开胸心脏左前降支冠状动脉结扎30 min后再灌注120 min的方法制备IR模型.采用在IR模型构建前2周经尾静脉注射包装有GSK-3β突变型基因的腺相关病毒(AAV9型)方法处理构建GSK-3β过表达.观察大鼠IR模型制备过程中是否有心肌缺血的ECG表现(ST段抬高,出现宽大Q波及心律失常等),120 min后经腹主动脉取血,检测肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)浓度;处死大鼠取心脏,计算心肌梗死体积;光镜下观察心肌病理学损伤;采用Western blot法测定心肌GSK-3β和caspase-3含量.结果 与Sham组比较,NI组、NS组、DS组、GS组cTnⅠ浓度明显升高,梗死体积明显增大,病理损伤加重,GSK-3β和caspase-3含量明显升高(P＜0.05);与NI组比较,NS组cTnⅠ浓度明显降低,梗死体积明显减小,病理损伤减轻,GSK-3β和caspase-3含量明显降低(P＜0.05);与NS组比较,DS组、GS组cTnⅠ浓度明显升高,梗死体积明显增大,病理损伤加重,GSK-3β和caspase-3含量明显升高(P＜0.05);DS组和GS组cTnⅠ浓度、心肌梗死体积、GSK-3β和caspase-3含量差异无统计学意义.结 论GSK-3β过表达可加重大鼠心肌IR损伤,七氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌IR时的保护作用减弱可能是通过GSK途径导致的.