SiRNA靶向抑制哮喘小鼠T细胞非受体酪氨酸蛋白激酶Lck的体内研究

摘要

目的通过siRNA的方法体内靶向抑制哮喘小鼠T细胞非受体酪氨酸蛋白激酶Lck的基因表达,研究Lck特异性siRNA对哮喘小鼠的治疗作用。方法化学法合成小鼠T细胞Lck基因特异的siRNA片段,以in vivo-jetPEITM作为转染试剂,将合成的RNA片段与转染试剂混合后通过尾静脉注射到哮喘小鼠体内,48 h后处死小鼠,ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子IL-4、IL-17的含量;HE染色观察肺组织病理改变情况;免疫组织化学法检测肺组织中Lck表达的变化;Western Blot法检测肺组织匀浆中Lck蛋白的含量。结果 SiRNA干扰组哮喘小鼠BALF中IL-4、IL-17[（142.62±15.57）pg/ml,（74.18±5.36）pg/ml]的水平较哮喘组[（234.68±11.15）pg/ml,（96.76±8.28）pg/ml]明显下降（P＜0.01）,肺组织炎症病理改变有所减轻,免疫组化提示肺组织中Lck蛋白表达下降,肺组织匀浆中Lck蛋白的表达下降（P＜0.05）。结论 Lck特异性siRNA可以降低哮喘小鼠肺组织中炎症因子IL-4、IL-17的水平,减轻肺部炎症反应,具有一定的治疗作用。